一、牛胚胎移植中影响胚胎质量的因素(论文文献综述)
李赫强[1](2021)在《牛体外生产关键技术的研究》文中研究说明目前牛的商品化冻精中含有较多能影响精子体外获能的成分,例如抗冻剂等;在精子体外获能之前,需先对解冻的精液进行必要的分离纯化,去除各种添加剂,为精子体外获能提供最优环境。因此,研究不同精子纯化方法对体外受精的影响、确定最优精子纯化方法以期提高体外胚胎生产效率具有重要意义。同期发情处理是胚胎移植过程中的关键一环,受体牛的发情同步及黄体质量会直接影响胚胎移植后的受胎率。本研究选取前列腺素和孕酮两种外源生殖激素,以荷斯坦母牛为试验对象,研究不同同期方案对胚胎移植受体牛的影响,以期提高受体母牛的利用率及胚胎移植后的受胎率。试验一:不同精子纯化方法对牛体外胚胎生产的影响本试验选择Percoll密度梯度离心法和上浮法处理冻精,再与体外成熟后的卵母细胞进行受精,重复8次,统计精子活力、精子密度、受精率、卵裂率和囊胚率。试验结果表明,Percoll法处理后的精子活力(0.65)与上浮法处理后(0.68)无显着差异(p>0.05),但两组均显着高于未处理的精子活力(0.41)(p<0.05);Percoll组精子密度(9.08×106/m L)显着高于上浮组(7.60×106/m L)(p<0.05)。Percoll组受精率(83.70%)和卵裂率(62.61%)显着高于上浮组(77.99%vs 51.62%,p<0.05);Percoll组囊胚率(31.18%)与上浮组囊胚率(30.94%)无显着差异(p=0.06)。试验二:不同同期发情方法对受体牛胚胎移植的影响选择90头健康、膘情适中的荷斯坦青年牛,随机分为两组,分别按照CIDR+PG和PG+PG同期方案进行激素注射,另挑选15头青年牛等待自然发情(对照),在发情后第7 d用B超对受体牛黄体直径(CLD)进行测量,对符合条件的受体牛进行胚胎移植。试验结果表明,CIDR+PG组发情率显着高于PG+PG组(91.11%vs 84.44%,p<0.05);CIDR+PG组中85.37%(35/41)的发情牛集中在撤栓后的2 d内,PG+PG组中73.68%(28/38)的发情牛集中在注射第二针PG后的2-3 d。CIDR+PG组黄体合格率(70.73%,29/41)显着高于PG+PG组(65.79%,25/38)(p<0.05)。将CLD分为10 mm≤CLD≤15 mm、15 mm<CLD≤25 mm、CLD>25 mm三组,研究不同同期发情处理后第7 d的CLD与受胎率之间的关系。CIDR+PG组间受胎率无显着差异(33.33%vs 35.71%vs 33.33%,p>0.05);PG+PG组间受胎率无显着差异(37.50%vs 36.36%vs 33.33%,p>0.05);CIDR+PG组与PG+PG组之间受胎率也无显着差异(p>0.05)。研究结果表明,与上浮法相比,Percoll密度梯度离心法可以提高精子的利用率、受精率和胚胎卵裂率。与PG+PG法相比,CIDR+PG法处理的受体牛发情率更高、发情时间更为集中、黄体合格率更高且受体牛利用率更高。不同同期发情方法处理后受体牛的CLD与受胎率之间无显着差异。
刘成军[2](2020)在《辅助生殖技术中同卵多胎影响因素及解决方法的研究》文中进行了进一步梳理经辅助生殖技术治疗后同卵多胎发生率明显高于自然妊娠,极大的增加了妊娠风险。目前研究已经证实年轻女性、诱导排卵药物及口服避孕药增加了同卵多胎的发生率,囊胚移植的同卵多胎发生率高于卵裂期胚胎,胚胎冷冻与同卵多胎的发生无关。授精方法和胚胎辅助孵化对同卵多胎的影响还没有达成共识,主要原因可能是相关研究没有限定年龄和移植胚胎的发育阶段。此外,目前大多研究是有关辅助生殖技术中影响同卵多胎的因素分析,还没有人研究如何降低同卵多胎的发生。鉴于患者的自身条件如年龄、不孕因素等无法改变,而我国对授精方法的选择也有严格限制,因此本研究主要对其它可能增加同卵多胎的因素进行了分析并提出解决方法。主要研究内容和结果如下:1.同卵多胎的影响因素分析本研究首先回顾性分析了自2010年11月到2019年10月接受体外受精-胚胎移植治疗的临床妊娠患者基本资料和同卵多胎的发生情况。将不确定因素-辅助孵化排除,采用Logistic回归分析方法对可能影响同卵多胎发生的因素进行了分析。结果发现:囊胚移植和多个胚胎移植增加了同卵多胎的发生风险,而促性腺激素用量≥3000 IU的患者同卵多胎发生风险降低。2.D2-D3胚胎辅助孵化与同卵多胎随后,我们研究分析了卵裂期胚胎(授精后D2-D3胚胎)激光透明带打薄与同卵多胎的关系,同时结合激光透明带打薄的安全性确定更合理的辅助孵化适应征。为了降低年龄对结果的影响,同时结合实际工作中辅助孵化的应用人群,将年龄分为两个阶段:高龄患者(≥38岁)和年轻患者(<38岁)。结果发现卵裂期胚胎透明带激光打薄后高龄患者同卵多胎发生风险是年轻患者的2.6倍(P<0.01),而且最新研究表明高龄患者辅助孵化不能提高妊娠率并降低了活产率,因此建议停止对高龄患者卵裂期胚胎实施辅助孵化。年轻患者卵裂期胚胎透明带激光打薄可以降低同卵多胎的发生风险(odds ratio=0.36,P<0.01),同时没有增加妊娠风险,因此对这部分患者可以实施辅助孵化以降低同卵多胎的发生风险。3.囊胚透明带激光打孔与同卵多胎囊胚移植同卵多胎的发生率高于卵裂期胚胎,这可能是由于延长胚胎体外培养时间造成透明带密度的增加,使囊胚孵出过程更加困难,透明带对囊胚的挤压增加从而使得囊胚分裂风险升高。本章研究了囊胚透明带激光打孔对同卵多胎发生的影响,同时结合其安全性确定是否可广泛应用于临床。结果发现:囊胚激光透明带打孔后体外受精(in vitro fertilization,IVF)来源囊胚的同卵多胎发生风险仍高于卵裂期胚胎(odds ratio=2.05,P<0.05),但卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)来源囊胚的同卵多胎发生率与卵裂期胚胎没有明显差异(odds ratio=0.66,P>0.05),同时透明带打孔没有明显增加妊娠风险。因此透明带激光打孔可以作为降低ICSI来源囊胚同卵多胎发生的措施之一。4.颗粒细胞中与囊胚形成相关Marker基因的筛选透明带打孔不能有效降低IVF来源囊胚发生分裂的风险,而且多个胚胎移植也增加了同卵多胎的发生率,因此本研究通过对颗粒细胞转录组测序来筛选与囊胚形成相关的Marker基因,以期用Marker基因来挑选优质卵裂期胚胎进行单胚胎移植,避免多个胚胎移植及囊胚移植带来的负面影响同时保证妊娠率。转录组测序共发现129个差异表达基因可能与囊胚形成相关。通过GO富集和KEGG富集分析进一步筛选,共有16个与胚胎发育潜力相关的候选基因。在16个基因中筛选出REN、COL1A1和COL1A2进行RT-qPCR验证,结果显示表达趋势都是上调,与测序结果一致,其中REN和COL1A2在高囊胚率的相对表达量均显着高于低囊胚率组。因此REN和COL1A2可以作为Marker基因来预测胚胎质量。综上所述,本研究发现辅助生殖技术中能采取措施以降低同卵多胎的影响因素有胚胎移植数、辅助孵化和移植胚胎发育阶段。为了降低多胚胎移植和囊胚移植对同卵多胎影响,可以用REN和COL1A2作为Marker基因选择卵裂期优质胚胎进行移植,降低胚胎移植数甚至单胚胎移植。同时对于卵裂期胚胎移植的患者采取如下措施:年龄<38岁的患者可以实施透明带激光打薄进一步降低同卵多胎的发生,而年龄≥38岁的患者不实施辅助孵化。
金敬栋[3](2020)在《延边黄牛活体采卵及胚胎移植技术应用研究》文中研究表明延边黄牛是具有延边朝鲜族特色的优质肉牛品种,是我国宝贵的耐寒黄牛品种资源,同时也是我国宝贵的畜禽品种资源财富。但目前延边黄牛品种资源的保护工作未被引起足够重视,基础设施和机构不够完善,基础母牛投入数量依然较少,新品种的选育选配进展缓慢,不能满足于市场需求。采用OPU技术的胚胎移植方法是提高母畜繁殖效率的有效途径之一。本试验将延边黄牛作为研究对象,探索适合延边黄牛产业化生产的活体采卵(OPU)、同期发情、胚胎移植等方法,为畜牧工作者提供可靠的实施依据。本试验的结果如下:1.延边黄牛OPU实施间隔2次/周与1次/周所获平均可利用卵子数量(平均可用卵数)和卵子回收率差异不显着(P>0.05)。2.利用OPU回收的可用卵数存在个体间的差异(P<0.05),但季节(春季、夏季)对延边黄牛OPU的卵子回收率差异不显着(P>0.05)。3.延边黄牛进行连续的OPU操作中,四月次的平均可用卵数显着低于其他月次(P<0.05)。4.实施同期发情技术在两种不同的季节(夏季、冬季)无显着性差异(P>0.05)。5.同期发情组与自然发情组的黄体合格率和胚胎移植受胎率差异不显着(P>0.05)。
张志鹏[4](2019)在《马胚胎移植及克隆胚体外构建技术》文中认为我国是世界马业大国,但并非马业强国。马存栏量虽大,却在现代马术的国际竞技场上未见身影。现代马术用马的匮乏,成为我国马产业发展的重要制约因素。胚胎移植技术已成熟应用于牛、羊等家畜的繁育生产,但马胚胎移植的各环节技术尚不完全成熟,相关研究与应用与马产业的发展不相适应。因此,本研究针对我国马业发展的技术需求,开展其发情鉴定、人工授精、非手术法胚胎采集和胚胎移植等马胚胎移植关键生物技术的研究。在此基础上,开展了卵巢的运输、卵母细胞采集、卵母细胞体外成熟、体细胞系的建立、细胞融合、体细胞核移植等马克隆胚胎体外构建技术的研究,其研究结果如下:1、母马发情的准确鉴别。摸索了 3种发情方法,发现B超检查法鉴定母马发情的成功率达到100%,显着高于外部观察法(47.3%)和直肠触摸法(85%),P<0.05。2、母马发情的有效诱导。建立了母马发情和同期发情的有效诱导方法,母马排卵第5 d,肌肉注射0.2 mg PGF2α后的发情率为63.2%,高于肌肉注射1500 IU PMSG和自然发情的比例(47.2%、0),P<0.05。有效的诱导6个品种马的发情,发情周期显着缩短,分别为 11.7±3.1、12.2±2.8、11.5±1.9、12.8±2.1、11.8±2.5 和 12.7±2.3 d。注射0.2 mg黄体酮和PGF2α方法母马的同期发情率为76.4±2.6%,显着高于单纯注射黄体酮组的62.8±2.1%和对照组的16.7± 1.2%,P<0.05。3、母马排卵的有效调控。建立了母马排卵的有效调控方法,关键在卵泡发育、激素类型和剂量的选择。当卵泡直径≥30 mm,静脉注射1500 IU hCG,48 h内的排卵比例为84.3%,显着高于FSH+LH组(31.6%)和对照组(15.8%)(P<0.05),6 个品种马分别在 41.2±2.3、43.9±2.7、42.3±1.6、39.7±3.1、40.9±2.9 和 39.8±2.4 h 时排卵。发现左侧卵巢的排卵率比右侧的高,59.5%排卵发生在左侧,高于右侧的40.5%(P<0.05)。4、马精液的保存与授精。建立了马精液的常温、低温和超低温保存的方法,常温(22℃)保存20 min,HN-SD(本实验室制备)和INRA96(IMV商品)组的精子活率分别为65.6±2.3%和68.6±1.2%,显着高于脱脂牛奶组的53.5±3.2%(P<0.05)。低温(0~4℃)保存24 h,HN-SD和INRA96组的精子活率分别是65.5±2.3%和67.7±2.1%,高于脱脂牛奶组的49.5±3.4%(P<0.05)。液氮(-196℃)保存精液1d后,INRA96组的精子活率为44.3±2.2%,HN-SD组为36.2±2.3%,高于脱脂牛奶组的21.3±1.8%(P<0.05)。摸索出了最适的输精部位,发现输精的不同部位对母马受胎率的影响不同,子宫角输精的母马情期受胎率为85.4%,显着高于子宫输精(78.4%)和自然交配(25%)(P<0.05)。保鲜精液的情期受胎率为61.1%,低于鲜精的84%,但高于冷冻精液的40%(P<0.05)。5、马胚胎的非手术法采集。建立了马胚胎的非手术采集方法,选取乳酸钠林格注射液作为冲胚液,在马受孕后5~8 d进行冲胚,采集的时间是关键环节。本研究胚胎采集成功率为72.8%。不同时间采集胚胎的成功率不同,5月份的胚胎采集成功率最高,为88.9%,10月份成功率最低,为42.9%。桑椹胚采集成功率为70.6%。6、马胚胎的非手术法移植。建立了马胚胎的非手术移植方法,选择排卵后4~7 d的受体马,选取IMV胚胎保存液进行子宫体移植。试验组HN-EHM和IMV胚胎保存液的胚胎移植成功率分别为80%和83.3%,高于乳酸钠林格注射液试验组(75%)。胚胎低温保存24 h后,移植成功率为60%。桑椹胚移植成功率为90.9%。7、马卵巢的运输。本试验获得马卵巢体外运输过程中保存液的合适温度,夏季为33~37℃,冬季为30~35℃。8、马卵丘-卵母细胞复合体(COCs)的采集。抽吸法+切割法的采集成功率最高,为73.3%,高于切割法(64.6%)和抽吸法(54.8%)的成功率(P<0.05)。发现繁殖季节的卵巢中大、中、小卵泡的比例分别是20.9%、51%和28.1%,非繁殖季节的比例分别是3.1%、51.9%和45%。9、马卵母细胞的体外成熟。摸索了马卵母细胞体外培养成熟的条件,5%CO2、37℃、饱和湿度培养,紧凑型(Cp)卵母细胞培养32~36 h,扩展型(Ex)培养24~28 h。结果发现不同类型的COC其成熟率不同,不同繁殖季节,卵母细胞的成熟率也不同。繁殖季节,马扩展型(Ex)的成熟率为58.6%,高于紧凑型(Cp)的成熟率36.5%(P<0.05),非繁殖季节,成熟率分别为29.1%和49.2%(P<0.05)。添加ActA能提高紧凑型(Cp)卵母细胞的成熟率,在繁殖、非繁殖季节卵母细胞成熟率分别达到 47.3%和 42.2%。10、马卵母细胞的孤雌激活。摸索了马卵母细胞孤雌激活的条件,本试验选取离子霉素进行孤雌激活,结果发现ActA促进马Cp型卵母细胞孤雌激活胚胎的发育,2-细胞(57.9%)、4-细胞(36.8%)的比例分别高于对照组(P<0.05)。不同的卵母细胞类型对卵母细胞孤雌激活后胚胎的发育没有影响。在马的繁殖季节,孤雌激活胚胎发育到2-细胞期、4-细胞、8-细胞和桑椹胚的比例分别是50%(42/80)、35.7%(30/84)、13.1%(11/84)和6%(5/84),高于非繁殖季节同时期的比例,(P<0.05)。在马的非繁殖季节,孤雌激活的胚胎与颗粒细胞共培养后,发育到2-细胞、4-细胞的比例分别为41.7%和25%,显着高于对照组的比例(P<0.05),获得1枚桑椹胚(2.8%)。11、马体细胞克隆胚的构建及体外培养。摸索了不同融合电压对重构胚胎融合率的影响,克隆胚胎置于38.5℃、5%C02、饱和湿度培养箱中培养,结果发现采用140 V,20μs,融合2次,重构胚胎融合成功率达到72%。马驹成纤维细胞的融合率、2-细胞,4-8细胞和桑椹胚的比例分别为77.4%、41.5%、33.9%和15.1%,高于成年马体细胞的相应比率(P<0.05)。用非手术法将构建好的8枚桑椹胚移植到受体马的子宫体中,没有获得克隆马。通过上述研究,本研究获得成熟的马胚胎移植技术体系,为实现规范化、商业化、市场化的繁殖现代马术用马提供的技术方案。在此基础上,研究体外诱导成熟的马卵母细胞构建克隆胚胎的技术,为我国突破马克隆技术奠定基础。
黄承俊,张文军,李宁[5](2019)在《牛羊胚胎移植研究进展》文中进行了进一步梳理作为重要的畜牧育种手段之一,胚胎移植已成为中大型养殖场不可或缺的基本技术。了解其包括同情发情、超数排卵、合子的获得与移植在内的不同技术环节,有助于胚胎移植技术体系的建立与优化,同时为相关人员提供一定的技术参考。
隋鹤鸣[6](2018)在《优质和牛超数排卵和胚胎移植技术的研究与应用》文中提出超数排卵和胚胎移植技术可最大程度地发挥母牛的繁殖潜力,实现快速扩繁,从而加速品种改良和育种进程,因此,研究超数排卵和胚胎移植技术对优质和牛繁殖效率的影响具有重要意义。本研究以和牛为试验对象,研究了影响优质和牛超数排卵和胚胎移植效果的因素,旨在为优质和牛体内胚胎生产和移植提供实践参考。试验一:选择34头青年和牛(1622月龄)和37头第一胎经产和牛作为供体,按4天8次递减肌肉注射FSH(Folltropin-V)进行超排处理,共超排112头次。试验结果表明:(1)供体母牛超排有效率为85.7%,共获得1145枚胚胎(头均获胚胎10.22枚),其中可用胚832(头均获胚胎7.43枚));(2)经产牛超排有效率(93.4%)显着高于青年牛(76.0%)(P<0.05),胚胎数和可用胚也高于青年牛,但两组无显着差异(P>0.05);(3)青年牛和经产牛的第一次和第二次超排有效率差异均不显着(P>0.05),但青年牛第二次超排胚胎数(6.20)和可用胚胎数(4.31)低于第一次胚胎数(8.68)和可用胚胎数(6.53);而经产牛的第二次超排胚胎数(12.92)高于第一次胚胎数(11.41),可用胚胎数(8.38)却稍低于第一次可用胚胎数(8.89);(4)不同剂量FSH可显着影响母牛超排效率,总剂量120mg FSH组青年牛超排有效率(50%)显着低于200mg和220mg组(P<0.05)。经产牛220mg组超排有效率(86.7%)显着低于230mg、240mg和250mg组,可用胚胎数(7.8)也低于其他组;(5)自然发情、前列腺素同期发情和埋植CIDR同期发情的超排有效率分别为85.4%、85.7%和88.9%,平均回收胚胎数分别为12.0、10.0、和12.3,可用胚胎数分别为8.7、7.2、和9.3,差异均不显着(P>0.05)。试验二:试验分别在2017年和2018年移植受体母牛321头次和192头次。结果表明:(1)2017年和2018年的胚胎移植妊娠率分别为40.50%和43.23%;(2)桑葚阶段和囊胚阶段胚胎移植妊娠率分别为32.0%和38.1%,两者差异不显着(P>0.05);(3)受体母牛移植2枚新鲜胚胎(B级胚胎)的妊娠率为75.00%,移植切割后新鲜双半胚的妊娠率为57.2%,移植1枚新鲜胚胎的妊娠率为55.00%,三者间差异不显着(P>0.05),但移植2枚新鲜胚胎(B级胚胎)的效果最好;(4)前列腺素1次同期处理发情的母牛胚胎移植妊娠率最高,而CIDR同期发情处理的受体母牛胚胎移植妊娠率最低,但三者间差异不显着(P>0.05);(5)常规冷冻方法冷冻胚胎的移植妊娠率显着低于新鲜胚胎和玻璃化冷冻方法冷冻的胚胎移植妊娠率(P<0.05)。
肖婷[7](2017)在《肉羊程序化与玻璃化冷冻胚胎移植效果的比较》文中研究说明本研究是通过对新疆阿克苏地区的纯繁黑头萨福克供体母羊做了超数排卵、人工授精、冲胚处理,获得鲜胚后,对受体母羊进行鲜胚移植以及采用程序化冷冻法和玻璃化冷冻法的冻融胚胎移植受胎率及产羔效果诸多影响因素的试验与对比分析,旨在建立一套高效的肉羊超排程序[1]及提高受体母羊移植受胎率的技术体系。试验一供体母羊年龄对超数排卵效果的影响本试验探讨了在新疆阿克苏地区对不同年龄段的黑头萨福克供体母羊进行超数排卵处理效果的影响,结果表明,用同种方法将三组不同年龄段的供体母羊分别用同种用药物进行超排处理后,其中1.52岁羊组与34岁羊组超排效果差异显着(P<0.05),34岁羊组与56岁羊组超排效果差异显着(P<0.05)。然而34岁羊组与56岁羊组超排效果均高于1.52岁羊组的超排效果(P<0.05)。对三组羊的可用胚胎的等级进行了比较,1.52岁羊与34岁羊超排获得A级胚胎效果差异显着(P<0.05),34岁羊组与56岁羊组经超排处理后,获得A级胚胎的效果差异显着(P<0.05)。试验二两种不同冷冻方法对冻胚移植受胎率及产羔率的影响为了探讨用两种不同的冷冻方法进行保存的冻胎移植对受胎效果的影响,本试验对471受体母羊进行了新鲜胚胎移植,对210只受体母羊进行了进口程序化冷冻胚胎移植,对26只受体母羊进行了玻璃化冷冻胚胎移植。结果表明:鲜胚与两种冻胚移植效果相比,受胎率差异显着(P<0.05)。将两种冻胚移植的受胎率及产羔效果进行比较,结果表明:玻璃化冷冻组和程序化冷冻组的移植受胎率分别为58.0%和49.5%,差异显着(P<0.05)。为了分析两种不同的冻融胚胎移植对产羔效果的影响,本试验对产羔情况做了统计,进口程序化冷冻组受胎104只羊,产羔86只,玻璃化冷冻组受胎14只羊,产羔13只。结果表明:玻璃化组和程序化组的胚胎移植产羔率分别92.9%和82.7%,差异显着(P<0.05)。试验三受体因素对萨福克羊鲜胚及杜泊羊冻胚移植效果的影响本文回顾分析了新疆地区一次萨福克羊鲜胚及杜泊羊冻胚的移植实验数据,旨在讨论受体因素对胚胎移植效果的影响。结果表明,受体羊在7 d时移植胚胎,杜泊羊冻胚桑椹胚移植后产羔率高于囊胚,差异显着;萨福克羊鲜胚移植时胚胎发育阶段及移植数量对移植后产羔率无显着影响。受体母羊先前手术次数对萨福克鲜胚移植后产羔率有显着影响,手术2次及以上的次数的母羊产羔率极显着地低于没有做过手术初次胚胎移植的母羊。受体母羊在卵巢上黄体数超过1个后,黄体数对产羔率无显着影响。
刘佳佳,马原,刘孝然,杨利国[8](2015)在《提高牛胚胎移植成功率的方法及措施》文中指出胚胎移植(embryo transfer,ET)技术作为现代生殖技术的一项重要内容,在畜牧生产中展现出重大的应用价值,在短短的几十年中发展迅速,现已具备相应的产业化能力。我国牛平均超排获得可用胚为56枚,鲜胚胎移植妊娠率为50%60%,冷冻胚胎移植妊娠率为40%50%,与发达国家的5.56.6枚、55%65%、50%60%相比,仍存在一定差距。本文旨在对影响牛胚胎移植效果的因素进行总结分析,简述国内外提高牛胚胎移植效率的方法及措施,为我国牛繁殖新技术的发展和推广应用提供一定的参考依据。
魏红芳,赵金艳[9](2014)在《影响牛胚胎移植效果的因素分析》文中研究指明近年来,胚胎移植技术在我国发展迅速,并在生产中得到了一定的应用,但由于费用比较高,且移植成功率受到很多因素影响,使其推广受到了很大限制。本文就牛胚胎移植过程中影响其移植成功率的几个方面因素,包括供体和受体牛的选择、供体和受体牛的同期发情程度、胚胎质量、移植者的技术操作水平、受体牛的饲养管理以及移植季节等作一综述。
刘佳佳,马原,刘孝然,杨利国[10](2014)在《提高牛胚胎移植成功率的方法及措施》文中认为胚胎移植(embryo transfer,ET)技术作为现代生殖技术的一项重要内容,在畜牧生产中展现出重大的应用价值,在短短的几十年中发展迅速,现已具备相应的产业化能力。我国平均超排获得可用胚为56枚、鲜胚胎移植率为5060%、冷冻胚胎移植妊娠率40—50%,与发达国家的5.5—6.6枚,5565%、5060%相比,仍旧存在一定差距。本文旨在对影响胚胎移植效果的因素进行总结分析,简述国内外提高胚胎移植效率的方法及措施,为我国繁殖新技术的发展和推广应用提供一定的参考依据。
二、牛胚胎移植中影响胚胎质量的因素(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、牛胚胎移植中影响胚胎质量的因素(论文提纲范文)
(1)牛体外生产关键技术的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
主要符号对照表 |
文献综述 |
第一章 牛体外胚胎生产及胚胎移植的研究进展 |
1.1 牛体外胚胎生产的研究进展 |
1.1.1 国内外牛体外胚胎生产的现状 |
1.1.2 牛体外受精技术的研究进展 |
1.1.3 牛体外胚胎生产效率的影响因素 |
1.2 牛胚胎移植的研究进展 |
1.2.1 国内外牛胚胎移植的状况 |
1.2.2 牛体外胚胎移植程序的研究进展 |
1.3 目的与意义 |
试验研究 |
第二章 不同精子纯化方法对牛体外胚胎生产的影响 |
2.1 材料和试剂 |
2.1.1 材料来源 |
2.1.2 仪器设备 |
2.1.3 主要溶液与试剂耗材 |
2.2 方法 |
2.2.1 卵母细胞的体外成熟 |
2.2.2 冻精的纯化分离 |
2.2.3 体外受精 |
2.2.4 数据统计分析 |
2.3 结果 |
2.3.1 精子不同纯化方法处理后精子活力和浓度 |
2.3.2 精子不同纯化方法处理后体外受精的结果 |
2.4 讨论 |
2.4.1 不同纯化处理对冻精指标的影响 |
2.4.2 不同纯化处理冻精对体外受精的影响 |
2.5 小结 |
第三章 不同同期发情方法对受体牛胚胎移植的影响 |
3.1 材料和试剂 |
3.1.1 材料来源 |
3.1.2 仪器设备 |
3.1.3 主要药品与耗材 |
3.2 方法 |
3.2.1 自然发情牛 |
3.2.2 PG+PG法处理受体牛 |
3.2.3 CIDR+PG法处理受体牛 |
3.2.4 胚胎移植前受体检查 |
3.2.5 胚胎移植 |
3.2.6 受体牛胎检 |
3.2.7 数据统计分析 |
3.3 结果 |
3.3.1 受体牛的发情分布 |
3.3.2 受体牛发情后第7 天黄体发育的结果 |
3.3.3 受体牛怀孕30 天的声像图 |
3.3.4 不同同期发情方法处理后受体牛的受胎率 |
3.3.5 部分体外生产犊牛图片 |
3.4 讨论 |
3.4.1 受体牛不同方法处理后同期发情规律 |
3.4.2 受体牛不同方法处理对黄体的影响 |
3.4.3 受体牛黄体直径对受胎率的影响 |
3.5 小结 |
全文结论 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
个人简历 |
(2)辅助生殖技术中同卵多胎影响因素及解决方法的研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
abstract |
前言 |
第一篇 文献综述 |
第一章 同卵多胎的研究进展 |
1.1 人类同卵多胎发生的研究进展 |
1.2 人类辅助色生殖技术中同卵多胎的研究进展 |
1.2.1 人类辅助生殖技术中同卵多胎的发生情况 |
1.2.2 ART中增加同卵多胎因素的研究 |
1.2.3 ART增加同卵多胎的机理 |
1.3 同卵多胎的妊娠风险及子代安全 |
第二章 ART中优质胚胎筛选方法的研究进展 |
2.1 形态学 |
2.2 基因表达 |
2.3 代谢物 |
第二篇 研究内容 |
第一章 同卵多胎的影响因素分析 |
1.1 研究设计和人群 |
1.2 同卵多胎的判定 |
1.3 统计分析的因素和方法 |
1.4 结果 |
1.5 讨论 |
1.6 小结 |
第二章 D2-D3胚胎辅助孵化与同卵多胎 |
2.1 透明带激光打薄对同卵多胎的影响 |
2.1.1 研究设计和人群 |
2.1.2 辅助孵化 |
2.1.3 同卵多胎的判定 |
2.1.4 统计方法 |
2.1.5 数据预处理和结果 |
2.2 D2-D3胚胎激光透明带打薄对妊娠风险的影响 |
2.2.1 研究设计和人群 |
2.2.2 妊娠风险比较的项目 |
2.2.3 统计方法 |
2.2.4 结果 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
第三章 囊胚透明带激光打孔与同卵多胎 |
3.1 囊胚透明带激光打孔对同卵多胎的影响 |
3.1.1 研究设计和人群 |
3.1.2 辅助孵化 |
3.1.3 同卵多胎的判定 |
3.1.4 统计方法 |
3.1.5 数据预处理和结果 |
3.2 囊胚透明带激光打孔对妊娠的影响 |
3.2.1 研究设计和人群 |
3.2.2 辅助孵化 |
3.2.3 统计的项目及定义 |
3.2.4 统计方法 |
3.2.5 结果 |
3.3 讨论 |
3.4 小结 |
第四章 颗粒细胞中与囊胚形成相关Marker基因的筛选 |
4.1 材料和方法 |
4.1.1 主要试剂 |
4.1.2 主要仪器 |
4.1.3 研究设计和人群 |
4.1.4 授精及胚胎培养流程 |
4.1.5 颗粒细胞的收集和分组 |
4.1.5 RNA的提取和测序 |
4.1.6 测序结果生物信息学分析 |
4.1.7 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) |
4.2 结果 |
4.2.1 样本基本资料 |
4.2.2 原始测序数据的质控 |
4.2.3 测序结果比对 |
4.2.4 高囊胚率与低囊胚率差异表达基因分析 |
4.2.5 差异表达基因的GO富集分析和KEGG富集分析 |
4.3 与囊胚形成相关基因的筛选 |
4.4 Marker基因的筛选和RT-qPCR验证 |
4.5 讨论 |
4.6 小结 |
结论 |
特别申明 |
参考文献 |
导师简介 |
作者简介 |
攻读博士期间取得的科研成果 |
致谢 |
(3)延边黄牛活体采卵及胚胎移植技术应用研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩略词表 |
第一章 绪论 |
1.1 延边黄牛简介 |
1.2 活体采卵技术(OPU) |
1.3 同期发情技术 |
1.4 胚胎移植技术 |
1.5 本试验的研究目的与意义 |
第二章 材料与方法 |
2.1 试验动物 |
2.2 试验试剂与耗材 |
2.3 试验方法 |
2.4 数据处理 |
第三章 结果与分析 |
3.1 不同个体对OPU效率的影响 |
3.2 不同采卵间隔对OPU的影响 |
3.3 季节对OPU的影响 |
3.4 连续操作时间对OPU的影响 |
3.5 延边黄牛两种同期发情方法在不同季节发情效果的比较 |
3.6 同期发情对胚胎移植效果的影响 |
第四章 讨论 |
4.1 活体采卵时个体间差异 |
4.2 不同采卵间隔对OPU的影响 |
4.3 季节对OPU的影响 |
4.4 连续操作时间对OPU的影响 |
4.5 季节对延边黄牛同期发情效果的影响 |
4.6 受体牛选择及同期发情对胚胎移植效果的影响 |
第四章 结论 |
参考文献 |
致谢 |
附录:试验照片 |
(4)马胚胎移植及克隆胚体外构建技术(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
1 引言 |
1.1 研究背景 |
1.1.1 国外马业现状 |
1.1.2 我国马业现状 |
1.1.3 存在的主要问题 |
1.2 马的生殖生理特点 |
1.2.1 生殖活动 |
1.2.2 生殖行为 |
1.2.3 生殖激素的调节 |
1.3 国内外研究进展 |
1.3.1 马胚胎移植技术 |
1.3.2 精液冷冻与授精 |
1.3.3 胚胎冷冻与移植 |
1.3.4 体外受精(IVF) |
1.3.5 单精子卵胞浆显微注射技术(ICSI) |
1.3.6 卵母细胞成熟 |
1.3.7 马的体细胞核移植(SCNT) |
1.4 本研究的目的意义及内容 |
1.4.1 研究目的意义 |
1.4.2 研究内容 |
1.4.3 技术路线 |
2 试验一: 马胚胎移植技术的研究 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 试验动物 |
2.1.2 动物饲养 |
2.1.3 试剂 |
2.1.4 试验设备 |
2.1.5 试剂制备 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 种马的选择 |
2.2.2 母马发情鉴别 |
2.2.3 母马发情调控 |
2.2.4 排卵调控 |
2.2.5 精液品质检测 |
2.2.6 精液的保存 |
2.2.7 人工授精 |
2.2.8 非手术法冲胚 |
2.2.9 胚胎的鉴定与保存 |
2.2.10 胚胎移植 |
2.2.11 妊娠诊断 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 母马的发情检查结果 |
2.3.2 不同激素诱导母马发情的试验结果 |
2.3.3 不同激素调控马排卵的比例 |
2.3.4 不同精液稀释液对精液品质的影响 |
2.3.5 不同输精方式对母马受孕率的影响 |
2.3.6 不同冲胚液对胚胎收集效率的对比与应用 |
2.3.7 不同胚胎移植方法的成功率 |
2.3.8 桑椹胚的收集与移植结果 |
2.3.9 不同妊娠诊断方法的比较 |
2.4 讨论 |
2.4.1 种马的选择 |
2.4.2 发情与卵泡生长的关系 |
2.4.3 超数排卵 |
2.4.4 采精与授精 |
2.4.5 马的胚胎移植 |
2.5 小结 |
3 马克隆胚胎体外构建技术的研究 |
3.1 试验材料 |
3.1.1 试验对象 |
3.1.2 试剂 |
3.1.3 设备 |
3.1.4 试剂制备 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 卵巢的采集 |
3.2.2 马卵巢卵母细胞的收集 |
3.2.3 卵母细胞体外成熟 |
3.2.4 成纤维细胞培养 |
3.2.5 孤雌激活 |
3.2.6 体细胞核移植 |
3.2.7 构建胚胎的移植 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 不同季节卵巢的最佳运输温度 |
3.3.2 马、驴卵巢、COCs形态的对比 |
3.3.3 COCs回收率 |
3.3.4 卵母细胞体外成熟 |
3.3.5 不同年龄马的成纤维细胞系的建立 |
3.3.6 孤雌激活胚胎的成功率 |
3.3.7 马体细胞核移植的试验结果 |
3.4 讨论 |
3.4.1 卵巢体外运输 |
3.4.2 母体的营养情况对卵母细胞成熟率的影响 |
3.4.3 ActA对卵母细胞的作用 |
3.4.4 体细胞系的建立 |
3.4.5 体细胞核移植 |
3.5 小结 |
4 全文总结 |
4.1 全文结论 |
4.2 本研究创新点 |
4.3 有待进一步研究的内容 |
4.3.1 胚胎移植技术的推广 |
4.3.2 马卵母细胞体外成熟技术 |
4.3.3 克隆胚胎的构建与体外发育 |
附录 |
1 胚胎移植马的选择标准(LH-201-2018) |
2 胚胎移植马选择结果 |
3 马人工授精技术规程(LH-202-2018) |
4 马胚胎移植技术规程(LH-203-2018) |
致谢 |
参考文献 |
作者简介 |
(6)优质和牛超数排卵和胚胎移植技术的研究与应用(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
第1章 文献综述 |
1 卵泡发育与超数排卵 |
1.1 发情周期卵泡发育 |
1.2 卵泡发育的激素调节 |
1.3 超数排卵 |
2 影响牛超数排卵效果的因素 |
2.1 外源生殖激素的影响 |
2.1.1 促性腺激素的影响 |
2.1.2 前列腺素的影响 |
2.1.3 雌激素的影响 |
2.1.4 其他激素的影响 |
2.2 供体牛的影响 |
2.2.1 牛种的影响 |
2.2.2 生产性能的影响 |
2.2.3 年龄的影响 |
2.2.4 发情周期阶段的影响 |
2.2.5 卵巢状态的影响 |
2.3 营养和环境的影响 |
2.3.1 营养水平的影响 |
2.3.2 体况的影响 |
2.3.3 环境因素的影响 |
2.3.4 疾病的影响 |
2.3.5 饲养管理方式的影响 |
2.4 超数排卵处理方法的影响 |
2.4.1 FSH注射方法的影响 |
2.4.2 同期发情方法的影响 |
2.4.3 超数排卵次数的影响 |
2.5 操作人员技术水平的影响 |
3.牛超数排卵技术的研究新进展 |
3.1 超数排卵方法 |
3.1.1 FSH一次注射 |
3.1.2 重组长效FSH |
3.2 供体牛的选择 |
3.2.1 抗缪勒管素与供体牛选择 |
3.2.2 其他选择方法 |
4.结语 |
第2章 优质和牛超数排卵与胚胎生产技术研究 |
1 试验材料与方法 |
1.1 试验材料 |
1.1.1 供体选择和饲养 |
1.1.2 试验药品与试剂 |
1.1.3 试验器材与用品 |
1.2 试验方法 |
1.2.1 供体同期发情处理 |
1.2.1.1 自然发情 |
1.2.1.2 前列腺素同期发情 |
1.2.1.3 CIDR同期发情 |
1.2.2 供体超数排卵 |
1.2.2.1 超排方法1 |
1.2.2.2 超排方法2 |
1.2.3 供体胚胎采集与质量鉴定 |
1.2.4 胚胎冷冻 |
1.2.4.1 常规冷冻与解冻 |
1.2.4.2 玻璃化冷冻与解冻 |
1.2.5 胚胎二分切割 |
1.2.6 统计分析 |
2 试验结果与分析 |
2.1 和牛胚胎生产 |
2.2 超排次数对和牛超排效果的影响 |
2.3 不同供体和牛对超排效果的影响 |
2.4 不同剂量FSH对和牛超排效果的影响 |
2.5 不同同期发情方法对和牛超排效果的影响 |
3 讨论与结论 |
3.1 不同和牛对超数排卵效果的影响 |
3.2 不同FSH剂量对和牛超数排卵效果的影响 |
3.3 不同同期发情方法对和牛超数排卵效果的影响 |
第3章 优质和牛胚胎移植试验 |
1 试验材料与方法 |
1.1 试验材料 |
1.1.1 受体选择与饲养 |
1.1.2 试验药品与试剂 |
1.1.3 试验器械与用品 |
1.2 试验方法 |
1.2.1 受体同期发情处理 |
1.2.1.1 自然发情 |
1.2.1.2 前列腺素同期发情 |
1.2.1.3 CIDR同期发情 |
1.2.2 冷冻胚胎解冻与装管 |
1.2.3 胚胎切割 |
1.2.4 胚胎移植 |
1.2.5 受体母牛妊娠检查 |
2 试验结果与分析 |
2.1 和牛胚胎移植 |
2.2 不同胚胎发育阶段对胚胎移植妊娠率的影响 |
2.3 双胚(半胚)对胚胎移植妊娠率的影响 |
2.4 不同同期发情方法对胚胎移植妊娠率的影响 |
2.5 不同冷冻方法对胚胎移植妊娠率的影响 |
3 讨论与结论 |
3.1 受体牛对胚胎移植妊娠率的因素 |
3.2 不同胚胎发育阶段对胚胎移植妊娠率的影响 |
3.3 新鲜胚胎和冷冻胚胎对移植妊娠率的影响 |
3.4 不同同期发情方法对胚胎移植妊娠率的影 |
3.5 双胚(半胚)对胚胎移植妊娠率的影响 |
第4章 全文结论 |
参考文献 |
作者简介及学习期间的主要研究成果 |
致谢 |
(7)肉羊程序化与玻璃化冷冻胚胎移植效果的比较(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
缩略词表 |
第一章 绪论 |
1 绵羊在我国的育种现状 |
2 动物胚胎移植技术的进展 |
2.1 国内外研究现状及分析 |
2.2 胚胎移植技术的意义 |
3 胚胎移植过程的几个环节 |
3.1 供体羊的选择 |
3.2 受体羊的选择 |
3.3 同期发情 |
3.4 供体羊的超数排卵 |
3.5 供体羊的配种 |
3.6 胚胎的分级 |
4 胚胎冷冻保存技术的研究 |
4.1 胚胎保存的概念 |
4.2 胚胎冷冻保存的意义 |
4.3 两种胚胎冷冻保存法及解冻 |
5 胚胎冷冻保存技术前景 |
6 胚胎移植存在的问题 |
6.1 胚胎来源的问题 |
6.2 胚胎移植技术人员不足问题 |
6.3 受体饲养管理水平低下的问题 |
7 本试验研究的目的与意义 |
第二部分 试验研究 |
实验一 供体母羊年龄对超数排卵效果的影响 |
前言 |
1 材料与方法 |
1.1 实验材料 |
1.2 试验方法 |
2 实验结果 |
2.1 供体母羊年龄对超数排卵效果的影响 |
3 讨论 |
3.1 供体母羊年龄对超数排卵效果的影响 |
4 结论 |
实验二 肉羊两种冷冻胚胎移植受胎率及产羔效果的比较 |
前言 |
1 材料与方法 |
1.1 实验材料 |
1.2 实验方法 |
2 实验结果 |
2.1 受体母羊同期发情处理效果 |
2.2 不同的冷冻方法对胚胎移植效果的影响 |
3 分析与讨论 |
3.1 两种不同的冷冻方法对胚胎移植受胎率及产羔效果的影响 |
4 结论 |
实验三 受体因素对萨福克羊鲜胚及杜泊羊冻胚移植效果的影响 |
前言 |
1 材料与方法 |
1.1 实验材料 |
1.2 实验方法 |
2 试验结果 |
2.1 不同的胚胎发育阶段及移植胚胎枚数对胚胎移植效果的影响 |
2.2 受体母羊卵巢情况对胚胎移植效果的影响 |
2.3 不同的术者对胚胎移植效果的影响 |
2.4 受体母羊先前手术次数对胚胎移植效果的影响 |
3 分析与讨论 |
3.1 胚胎发育阶段和移植胚胎枚数对胚胎移植效果的影响 |
3.2 受体母羊卵巢状况及先前手术次数对胚胎移植效果的影响 |
3.3 移植技术对比 |
4 结论 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
(8)提高牛胚胎移植成功率的方法及措施(论文提纲范文)
1胚胎移植概念 |
2胚胎移植的基本过程 |
3影响胚胎移植效果的因素 |
3.1供体和受体的选择 |
3.2供体和受体的同期发情及发情鉴定 |
3.3供体的超数排卵 |
3.4胚胎的收集和鉴定 |
3.5胚胎的移植和发育 |
4提高胚胎移植成功率的方法及措施 |
4.1选择合适的供体和受体 |
4.2提高同期发情率并准确进行发情鉴定 |
4.3提高超排效率的方法及措施 |
4.4提高胚胎收集的方法与措施 |
4.5提高移植受胎率的方法及措施 |
5结束语 |
(9)影响牛胚胎移植效果的因素分析(论文提纲范文)
1 供体牛和受体牛的选择 |
2 供体、受体牛发情的同期化程度 |
3 胚胎质量 |
4 移植者的技术水平 |
5 受体牛的饲养管理 |
6 移植季节 |
7 小结 |
四、牛胚胎移植中影响胚胎质量的因素(论文参考文献)
- [1]牛体外生产关键技术的研究[D]. 李赫强. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [2]辅助生殖技术中同卵多胎影响因素及解决方法的研究[D]. 刘成军. 吉林大学, 2020(01)
- [3]延边黄牛活体采卵及胚胎移植技术应用研究[D]. 金敬栋. 延边大学, 2020(05)
- [4]马胚胎移植及克隆胚体外构建技术[D]. 张志鹏. 内蒙古农业大学, 2019(08)
- [5]牛羊胚胎移植研究进展[J]. 黄承俊,张文军,李宁. 现代畜牧兽医, 2019(05)
- [6]优质和牛超数排卵和胚胎移植技术的研究与应用[D]. 隋鹤鸣. 吉林大学, 2018(04)
- [7]肉羊程序化与玻璃化冷冻胚胎移植效果的比较[D]. 肖婷. 新疆农业大学, 2017(02)
- [8]提高牛胚胎移植成功率的方法及措施[J]. 刘佳佳,马原,刘孝然,杨利国. 中国奶牛, 2015(15)
- [9]影响牛胚胎移植效果的因素分析[J]. 魏红芳,赵金艳. 四川畜牧兽医, 2014(07)
- [10]提高牛胚胎移植成功率的方法及措施[A]. 刘佳佳,马原,刘孝然,杨利国. 第五届中国奶业大会论文集, 2014