一、β-兴奋剂的检测方法概述（论文文献综述）
李红杰[1]（2021）在《新兴技术在沙丁胺醇残留检测中的应用进展》文中进行了进一步梳理由于沙丁胺醇被越来越多的不法商家应用于农产品中,以及沙丁胺醇在体育竞技项目也成为了被禁用的产品之一,其检测方法逐渐引起人们的重视,除了常见的色谱法,酶联免疫法,免疫分析法等,一些新兴技术产业也被应用在沙丁胺醇等β-兴奋剂的检测过程中。全文综述了沙丁胺醇残留的检测现状,以及运用新兴技术的一些检测方法和沙丁胺醇残留的检测前景等,为沙丁胺醇在化学,生物领域的更多检测方法的研究提供一定的参考依据。
张立佳,胡雪,莫楠,白艳梅,张悦,刘丽君,李翠枝[2]（2020）在《超高效液相色谱-串联质谱法测定牛乳中21种β-兴奋剂》文中研究说明建立超高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛乳中21种β-兴奋剂残留量。样品经酶解、固相萃取柱净化,采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱（50 mm×2.1 mm,1.7μm）分离,以0.1%甲酸-10%甲醇水溶液为流动相梯度洗脱,在电喷雾离子源正离子模式下,采用多反应监测模式,对21种β-兴奋剂进行定性和定量分析。结果表明:该方法的定量限为0.05μg/kg,在0.05、0.10、0.50μg/kg 3个不同添加水平下,平均回收率为61.0%～124.3%,相对标准偏差为2.39%～10.66%;该方法稳定、准确、灵敏度高,可用于牛乳中21种β-兴奋剂残留量检测。
任宏彬,杨晓伟,贾晓婷,杨蒲晨,张志华,郭素平[3]（2020）在《高效液相色谱-质谱联用同时检测动物源食品中9种β-兴奋剂残留》文中进行了进一步梳理研究建立利用高效液相色谱-质谱联用分析方法检测动物源食品中9种β-兴奋剂残留。样品中的β-兴奋剂经乙酸铵缓冲溶液提取,固相萃取柱净化,Shim-pack GIST C18（100 mm×2.1 mm, 2μm）色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源在正离子扫描方式下以多反应监测模式检测,内标法定量。结果显示,9种β-兴奋剂在1～50 ng/mL线性范围内,线性关系良好,检出限介于0.5～1.0μg/kg,方法在3个加标水平下的平均回收率为75.8%～113.4%,相对标准偏差为2.8%～9.4%。本方法具有前处理操作相对简便,检测结果准确度高和稳定性好等特点,可对动物源食品中的9种β-兴奋剂进行同时检测。
汪洋[4]（2018）在《超高压液相色谱—四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱快速筛查养殖水产品及渔用投入品中多种类药物的研究》文中研究说明药物残留是指动物产品的可食用部分所含药物的母体化合物或其代谢物,以及与药物有关杂质的残留。随着高密度养殖技术的发展,水产品在养殖过程中不可避免的会接触各种药物,这就使得药物残留成为威胁消费者健康的一个重要因素。一般情况下,根据法规规定合理使用药物并不会造成药物残留超标。但是在实际养殖过程中,一些养殖户为了追求经济利益最大化,或者出于防病、治病的目的,在养殖过程中超量、超范围使用药物,甚至违法添加禁用药物或者非药物成分的非法添加物,导致水产品中药物残留超标或者出现禁用药物和非法添加物。这些残留的药物或非法添加物,通过食物链进入人体后会对消费者健康造成严重威胁,一些禁用药物和非法添加物还有致癌、致畸、致突变作用。而饲料在水产养殖过程中扮演了重要角色,若无法保证饲料的安全性,那么水产品的安全也就无从谈起。因此大部分国家都对药物的使用做出了明确的规定。因此,建立一种能够快速筛查渔药、饲料和水产品中药物或污染物的方法,且检测效率高,同时测定的药物或污染物种类多,对水产品和渔用投入品的质量安全监管具有十分重要的意义。目前养殖水产品和渔用投入品中药物的监管模式仅是针对已知的药物进行监测,且大多只能测定一类药物或者少数几类药物,无法知道产品中是否还存在其他药物,存在严重的漏检现象;另外,每类药物均采用不同的检测方法,检测周期长、试剂消耗大,耗时耗力。由于检测效率的低下和检测技术的局限性,造成了不能及时全面、准确地了解养殖水产品中药物残留状况,无法了解所使用的渔药和饲料中是否含有违规药物,致使投入品和水产品的安全隐患很难被发现,渔业事故在短时间内也很难得到正确的判断和处置。因此,开展渔药、饲料和水产品中多种类药物及污染物同时快速筛查方法的研究,建立相应的快速筛查技术,迅速了解渔药、饲料和水产品中存在的安全隐患,为养殖水产品及渔用投入品的隐患排查、风险评估及质量监管提供有效的技术支撑。本项目针对水产品养殖过程用药特点及国内外药物残留监管热点,建立了用于养殖水产品和渔用投入品中药物筛查数据库;根据养殖水产品、渔药和饲料的性质及药物的特点,研究了高通量的液相色谱和质谱分析条件和适合不同类型样品的高通量样品前处理方法;获得如下成果:1.利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱和TraceFinder（EFS,version 3.3）软件,建立了500种化合物筛查数据库,其中兽药430种、农药47种、其他污染物23种,数据库中包含化合物名称、CAS号、分子式和化合物精确质量数等基本信息,该数据库可用于非目标物筛查。数据库中有271种化合物具有色谱、质谱指纹信息,可进行目标物的准确定性分析。2.开发了271种化合物同时测定的超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱仪器分析方法。最佳的仪器分析条件为:H-ESI离子源,喷雾电压:3200 V（+）,2800 V（-）;鞘气:8 L/min;辅气:10 L/min;吹扫气:1.5 L/min;辅气加热温度:350℃;离子传输管温度:325℃;质谱数据获取模式:Full MS/dd-MS2（TopN）。Full MS分辨率70000,最大注入时间:100 ms,扫描范围（m/z）:1501000;二级质谱分辨率17500,触发阈值为1×104,最大注入时间:80 ms,单次采集前2强的离子（TopN）。其中,500 ng/mL浓度下可检出271种化合物,100 ng/mL可检出269种化合物,50 ng/mL可检出258种化合物,20 ng/mL可检出250种化合物,10 ng/mL可检出241种化合物,5 ng/mL可检出227种化合物,2ng/mL可检出199种化合物,1 ng/mL可检出171种化合物。3.建立了渔药中258种药物同时测定的筛查方法。方法筛查限为0.01 mg/kg（0.01mg/L）0.5 mg/kg（0.5 mg/L）,其中215种药物可在0.01 mg/kg（0.01 mg/L）浓度检出,16种药物可在0.05 mg/kg（0.05 mg/L）浓度检出,22种药物可在0.1 mg/kg（0.1 mg/L）浓度检出,5种药物可在0.5 mg/kg（0.5 mg/L）浓度检出。4.建立了饲料中175种药物同时测定的筛查方法,方法筛查限为10μg/kg200μg/kg。在200μg/kg浓度下可确证筛查出175种药物,50μg/kg浓度下确证筛查出136种药物,10μg/kg浓度下确证筛查出116种药物,三个加标浓度下均有超过80%的药物回收率在30%110%之间。5.分别建立了同时测定低脂肪水产品、高脂肪水产品和高脂肪高色素水产品中250种化合物的筛查方法,方法筛查限为1μg/kg200μg/kg。以草鱼、虾、鳗鲡和河蟹为研究对象,在200μg/kg加标时草鱼、虾、鳗鲡和河蟹可分别检出245、248、248和215种化合物。50μg/kg加标时,草鱼、虾、鳗鲡和河蟹可分别检出236、241、241和196种化合物。20μg/kg加标时,草鱼、虾、鳗鲡和河蟹可分别检出224、237、235和176种化合物。5μg/kg加标时,草鱼、虾、鳗鲡和河蟹可分别检出200、212、214和138种化合物。1μg/kg加标时,草鱼、虾、鳗鲡和河蟹可分别检出134、161、136和65种化合物。6.运用建立的多残留筛查方法对市场流通的渔药、饲料和水产品进行了药物成分和残留筛查,共筛查了35个渔药样品、30个饲料样品和48个水产品样品,其中在18个渔药样品检出了说明书未标明的药物成分,涉及的药物种类有喹诺酮类、四环素类和磺胺类等;7个饲料样品中检出了呋喃唑酮、丙酸睾酮、甲羟孕酮和地克珠利4种禁用药物;39个水产品样品中检出了磺胺类、四环素类、β-兴奋剂类和喹诺酮类等12类29种药物。
申惠敏[5]（2017）在《动物组织中β-兴奋剂类药物残留检测方法研究进展》文中研究表明随着我国对动物性食物中药物残留的管控不断加强,相应的药物残留检测技术也随之不断提升,β-兴奋剂类药物就是其中最重要的一种。动物因超量被喂饲β-兴奋剂药物,致使动物组织中存在了过量的β-兴奋剂残留药物,从而对人类产生了比较严重的危害,近年来我们在该类药物在动物组织中的残留检测技术方面取得了一定的研究进展。
刘硕,陶晓奇[6]（2017）在《β-兴奋剂在动物性食品中残留的免疫分析方法研究进展》文中认为β-兴奋剂能够降低动物体内脂肪含量,促进蛋白质合成,提高瘦肉率和饲料转化率,常被用作饲料添加剂。但是由于β-兴奋剂会在动物组织内残留,通过动物源食品进入人体内,会引起心悸、头疼、毒害肝肾等严重危害,包括我国在内的大多数国家已禁止畜牧业中应用此类药物。文章就免疫分析法总结介绍其基本原理、研究进展、优缺点、发展趋势,涵盖放射免疫分析、酶免疫分析、化学发光免疫分析、荧光免疫分析、胶体金标记免疫分析、免疫传感器、免疫芯片、流动注射免疫分析、免疫PCR等技术。
林晓慧[7]（2017）在《畜产品中β-兴奋剂ELISA快速检测方法的建立与检测》文中研究说明β-兴奋剂（β-adrenergic agonist）是苯乙醇胺的一类衍生物。对动物体具有促进肌肉组织生长,影响脂肪含量,能提高动物组织的瘦肉率和增加瘦肉的产量。高残留的β-兴奋剂,会产生极强的毒副作用,甚至危及生命。现在人工合成的β-兴奋剂有十余种,克伦特罗,沙丁胺醇,莱克多巴胺是目前国内外主要常用的β-兴奋剂。目前,欧美等国家都限制了其在畜牧生产上的使用,我国各部门包括卫生部,农业部,国家药品监督管理局共同发布的公告中,都明确规定和禁止了β-兴奋剂药物在饲料和动物饮用水中的使用。因此,开发针对动物源性食品中的β-兴奋剂的快速检测方法,对保障食品安全具有重要意义。为了建立快速、灵敏、低成本、高通量的β-兴奋剂残留免疫学研究分析方法,本研究在分析β-兴奋剂免疫学特性的基础上,利用β-兴奋剂的单克隆抗体,建立了β-兴奋剂的酶联免疫分析方法以及应用。主要成果如下:（1）β-兴奋剂间接ELISA分析方法的建立分别对包被原的浓度、抗体稀释的倍数、抗体稀释液的选择、抗体反应的时间、pH值等参数进行优化,建立了间接ELISA检测方法。最终确定包被抗原浓度为250μg/L;抗体稀释浓度是127μg/L;离子浓度为0.2 mol/L的PB缓冲液,最佳pH值为7.2;一抗反应时间为30 min。对猪尿液的添加回收率为80.0-104.0%,该方法灵敏度高、回收率好、假阳性率少,测定结果准确。（2）β-兴奋剂试剂盒的制备采用间接竞争ELISA法构建β-兴奋剂试剂盒。通过棋盘法和单因素实验优化条件建立标准曲线,检测半抑制浓度克伦特罗IC50为1.18μg/L,沙丁胺醇IC50为1.42μg/L。克伦特罗线性范围IC20-IC80为:0.31-4.52μg/L,检测限为0.05μg/L;沙丁胺醇线性范围IC20-IC80为:0.70-5.32μg/L,检测限为0.10μg/L,检测范围为0.05-4.5μg/L;与克伦特罗（CLB）的交叉率是100%,与沙丁胺醇（SAL）的交叉率是83.1%,与马布特罗（MBL）的交叉率是42%,与溴布特罗（BBL）的交叉率是25.82%,与氯丙那林（CPL）的交叉率是9.16%,与西马特罗（CML）的交叉率是5.41%,与莱克多巴胺（RAC）的交叉率少于5%;试剂盒在37℃存放6天,在4℃存放一年以上,试剂盒的灵敏度变化较小,稳定性较好;批间和批内的变异系数均<15%,方法精密度高;样品的添加回收率在80.0%-104.0%之间,方法准确度高,样品假阳性少。将试剂盒产品应用于实际样品检测,效果良好。
林俊潇[8]（2017）在《苯乙醇胺A免疫-LAMP检测技术的研究》文中进行了进一步梳理苯乙醇胺A（phenylethanolamine A,PEAA）是β-肾上腺素受体激动剂中的一种,一般被使用在生物的饲料中,从而提高生物的胴体瘦肉率。但研究表明,通过食物链的传递,苯乙醇胺A会在人体内累积,当达到一定量后会对人体的健康产生极大的威胁。目前,农业部明确禁止该物质添加在动物饲料和动物饮水中。本论文将荧光定量PCR和酶联免疫吸附法（ELISA）相结合,同时加入LAMP检测技术,建立了对苯乙醇胺A的检测技术:免疫PCR和免疫LAMP。获得的结果如下:1、从头合成苯乙醇胺A,然后通过兰尼镍还原法,得到苯乙醇胺A氨基衍生物,即PEAA-NH2。将PEAA-NH2分别与卵清白蛋白（OVA）和牛血清白蛋白（BSA）进行重氮化反应,分别合成出包被原PEAA-OVA和免疫原PEAA-BSA。采用常规免疫方法进行免疫新西兰大白兔,通过效价测定,获得了多克隆抗体PEAA pAbs（1#和5#）。2、以制备好的PEAA-OVA人工抗原和PEAA多克隆抗体为基础,建立了用于检测PEAA残留的间接竞争ELISA方法。通过制作标准曲线得到此方法检测PEAA时的IC50值为0.401 ng/m L,最低检测限（LOD）为0.035 ng/mL,对苯乙醇胺A的交叉反应率很高,并且对其余11种β-受体激动剂交叉反应率均在0.01%以下。在实际样品检测时,板内回收率为86.2-116.6%,相对标准偏差为1.66-4.52%。同时测的板内变异系数（CV%）在4.5-5.5%之间,平均变异系数为4.41%,板间变异系数为9.58%,CV均低于10%,证明此方法是可靠的。3、本研究结合了酶联免疫吸附法（ELISA）的高特异性和荧光定量PCR的高灵敏度,将抗原抗体结合步骤中的酶标记物,替换为报告DNA,并用荧光定量PCR仪进行信号检测,建立苯乙醇胺A免疫PCR检测方法。将PCR引物的5’-端标记生物素,报告DNA和多克隆抗体用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯化法标记生物素,通过生物素与链霉亲和素的特异性结合来放大抗原抗体结合的信号。在一系列优化后最终建立了用于检测PEAA的IPCR反应体系:用于反应的PCR管需用1%戊二醛进行预处理,包被原PEAA-OVA和生物素标记后的PEAA多克隆抗体的最佳工作浓度分别为2μg/m L和2.1μg/m L,亲和素的最佳工作浓度为1.5μg/mL,生物素标记的报告DNA的最佳加入为1.41 ng,最终用PBST与ddH2O分别洗涤5次。经检测,该方法的IC50为0.023±0.005 ng/mL,最低检测限为0.0021ng/mL,与间接竞争ELISA方法相比,均提高了一个数量级。线性检测范围在0.0001-100 ng/mL之间,与间接竞争ELISA方法相比,前后各拓展了两个数量级。该方法中,PEAA-多克隆抗体对PEAA有很高的特异性,与其他的11种β-兴奋剂类物质没有交叉反应（CR<0.05%）。并且通过精密度实验得到板内板间的CV均小于10%,说明了该方法的可靠性。4、以IPCR检测方法为基础,加入LAMP技术。在完成以PCR的扩增片段（209bp）作为目标序列的LAMP引物设计,高效LAMP体系优化,确定外内引物比为1:8、反应温度为65℃以及Bst聚合酶的添加量为8 U,以及包被抗原与生物素标记抗体ILAMP体系下的最佳工作浓度优化（2μg/mL和2.1μg/m L）后建立了PEAA的免疫LAMP检测方法。实验结果表明该方法标准曲线的线性方程为:y=1.1949x+42.251,R2=0.956。线性检测范围为0.0001-100 ng/mL,同建立的IPCR检测相同。IC50为0.0396±0.009 ng/mL,同间接竞争ELISA相比,提高了一个数量级,最低检测限为0.0044 ng/m L,同样提高了一个数量级。精密度实验结果显示变异系数（CV）不超过10%,证明了该方法的可靠性,且ILAMP特异性检测结果表明,该方法对PEAA有很高的特异性,与其他11种β-受体激动剂物质没有交叉反应（CR<0.04%）。本研究从头合成苯乙醇胺A,然后获得了苯乙醇胺A氨基衍生物（PEAA-NH2）,以PEAA-NH2为基础,成功制备了PEAA-BSA及PEAA-OVA。用制备的免疫原常规免疫新西兰大白兔后,得到了高效价、专一性强的多克隆抗体,在此基础上建立了苯乙醇胺A的间接竞争ELISA检测法。接着结合苯乙醇胺A的间接竞争ELISA检测法和荧光定量PCR建立了苯乙醇胺A的免疫PCR法,最终基于免疫PCR法建立了苯乙醇胺A的免疫LAMP检测方法。通过特异性实验,准确度实验来检测该方法的可靠性。
聂婉,伍晓红,陈秋玲,王琤韡[9]（2016）在《β-兴奋剂性质及其最新检测方法研究进展》文中进行了进一步梳理随着人们对食品安全的重视,动物性食品中β-兴奋剂的检测技术也日益完善。在改进现有方法之余,国内外近几年也研发出了诸多检测β-兴奋剂的新技术。对此,文章详细阐述了20种常见β-兴奋剂的基本信息,其中包括β-兴奋剂的药用价值、在饲料中的常用形式、对人体的不良反应。同时总结了近年来国内外β-兴奋剂新兴检测方法的研究进展,并提出未来的研究方向应朝着全自动多残留检测的一体化模式改进,减少人工操作,缩短检测时间,提高精密性和检测效率。
李莎,白瑞樱,曾道平,伍志权,沈玉栋,徐振林,杨金易[10]（2016）在《胶体金免疫层析试纸条在猪尿β-兴奋剂多残留检测中的应用》文中研究指明本研究采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,并对β-兴奋剂单克隆抗体进行标记。通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,研制出能同时检测多种β-兴奋剂的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,本方法对克伦特罗的灵敏度最高,检测线性范围（IC20IC80）为0.314.52μg/L,IC50为1.18μg/L,检出限（LOD,IC10）为0.14μg/L,猪尿样品无需处理,直接检测,单个样品检测时间只需8 min;与沙丁胺醇、马布特罗、溴布特罗、氯丙那林、西马特罗等β-兴奋剂类药物都有交叉,能实现β-兴奋剂的多残留检测。对阴性猪尿的加标回收实验中,试纸条批内实验回收率在83.6%102.2%之间,试纸条批间实验回收率在84.2%101.5%之间,且相对标准偏差均在10%以内,与ELISA、HPLC/MS法的对比实验表明,该试纸条能应用于猪尿中β-兴奋剂多残留的定量检测。
二、β-兴奋剂的检测方法概述（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、β-兴奋剂的检测方法概述（论文提纲范文）
（1）新兴技术在沙丁胺醇残留检测中的应用进展（论文提纲范文）
| 1 沙丁胺醇残留物的检测现状 |
| 2 沙丁胺醇残留的前处理 |
| 3 沙丁胺醇残留的最新检测方法 |
| 3.1 化学检测 |
| 3.1.1 化学分析法 |
| 3.1.2 仪器分析法 |
| 3.2 生物检测 |
| 3.2.1 生物传感器（biosensor,BS）技术 |
| 3.2.2 生物芯片（biochip）技术 |
| 3.3 首要代谢产物的检测 |
| 3.4 其他检测方法 |
| 3.4.1 电化学检测 |
| 3.4.2 材料改造型检测 |
| 4 展望 |
（2）超高效液相色谱-串联质谱法测定牛乳中21种β-兴奋剂（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料与试剂 |
| 1.2 仪器与设备 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 样品前处理 |
| 1.3.1. 1 提取 |
| 1.3.1. 2 净化 |
| 1.3.1. 3 标准曲线的绘制 |
| 1.3.2 色谱条件 |
| 1.3.3 质谱条件 |
| 1.3.4 结果计算 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 前处理方法的选择 |
| 2.1.1 预处理液的选择 |
| 2.1.2 净化方法的选择 |
| 2.1.3 定量方法的选择 |
| 2.2 质谱条件优化 |
| 2.3 色谱条件优化 |
| 2.4 标准曲线和定量限 |
| 2.5 方法回收率和精密度 |
| 2.6 实际样品测定 |
| 3 结论 |
（3）高效液相色谱-质谱联用同时检测动物源食品中9种β-兴奋剂残留（论文提纲范文）
| 一、材料与方法 |
| （一）仪器与设备 |
| （二）材料与试剂 |
| （三）试验设计 |
| 1. 混合标准工作液的配制。 |
| 2. 样品前处理。 |
| 3. 色谱条件。 |
| 4. 质谱条件。 |
| 二、结果与讨论 |
| （一）质谱条件的优化 |
| （二）流动相的选择 |
| （三）样品前处理方法的选择 |
| （四）β-兴奋剂线性回归方程 |
| （五）方法检出限 |
| （六）加标回收和精密度试验 |
| （七）能力验证活动和样品检测 |
| 三、结论 |
（4）超高压液相色谱—四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱快速筛查养殖水产品及渔用投入品中多种类药物的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 兽药残留的来源 |
| 1.2 兽药残留的危害 |
| 1.2.1 急性毒性 |
| 1.2.2 “三致”作用 |
| 1.2.3 过敏反应 |
| 1.2.4 对肠道菌群的影响 |
| 1.2.5 对耐药性的影响 |
| 1.3 水产品中常见药物及性质 |
| 1.3.1 磺胺类 |
| 1.3.2 喹诺酮类 |
| 1.3.3 四环素类 |
| 1.3.4 大环内酯类 |
| 1.3.5 激素类 |
| 1.4 药物多残留检测方法研究进展 |
| 1.5 立项的目的意义及研究内容 |
| 1.6 研究技术路线 |
| 第二章 数据库的构建和仪器分析方法的建立 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 数据库的构建 |
| 2.2.1 数据库中目标物的确定 |
| 2.2.2 数据库建立 |
| 2.3 筛查标准设置 |
| 2.4 仪器分析方法建立 |
| 2.4.1 仪器与试剂 |
| 2.4.1.1 仪器 |
| 2.4.1.2 试剂 |
| 2.4.2 标准溶液配制 |
| 2.4.3 仪器分析条件的优化 |
| 2.4.3.1 色谱柱的选择 |
| 2.4.3.2 流动相的选择 |
| 2.4.3.3 质谱参数的优化 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 水产品中药物及其他污染物残留筛查方法建立 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 仪器与试剂 |
| 3.2.1 仪器与材料 |
| 3.2.2 试剂 |
| 3.2.3 标准溶液配制 |
| 3.3 样品前处理 |
| 3.3.1 样品制备 |
| 3.3.2 提取 |
| 3.3.3 净化 |
| 3.4 液相色谱高分辨质谱仪分析条件 |
| 3.5 定性筛查原则 |
| 3.6 结果与讨论 |
| 3.6.1 提取方法的优化 |
| 3.6.1.1 提取剂的优化 |
| 3.6.1.2 提取方式的优化 |
| 3.6.2 净化方法的研究 |
| 3.6.2.1 低脂肪水产品 |
| 3.6.2.2 高脂肪水产品 |
| 3.6.3 基质效应 |
| 3.6.4 针式滤膜的选择 |
| 3.6.5 回收率和稳定性 |
| 3.6.6 不同基质中的检出浓度 |
| 3.6.7 实际样品筛查 |
| 3.7 本章小结 |
| 第四章 渔药和饲料中药物筛查方法建立 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 仪器与试剂 |
| 4.2.1 仪器与材料 |
| 4.2.2 试剂 |
| 4.2.3 标准溶液配制 |
| 4.3 样品前处理 |
| 4.3.1 饲料 |
| 4.3.2 渔药 |
| 4.4 液相色谱高分辨质谱仪分析条件 |
| 4.5 定性筛查原则 |
| 4.6 结果与讨论 |
| 4.6.1 饲料 |
| 4.6.1.1 提取剂的优化 |
| 4.6.1.2 净化方法的优化 |
| 4.6.1.3 方法评价 |
| 4.6.2 渔药 |
| 4.6.2.1 样品前处理方法的研究 |
| 4.6.2.2 方法灵敏度 |
| 4.7 实际样品筛查 |
| 4.8 本章小结 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间所获成果 |
（5）动物组织中β-兴奋剂类药物残留检测方法研究进展（论文提纲范文）
| 1 β-兴奋剂残留的免疫分析技术 |
| 1.1 应用化学发光免疫法检测β-兴奋剂残留 |
| 1.2 应用荧光免疫法检测β-兴奋剂残留 |
| 1.3 应用放射免疫层析法检测β-兴奋剂残留 |
| 2 β-兴奋剂类多残留色谱法检测技术 |
| 2.1 应用毛细管电泳技术进行β-兴奋剂残留检测 |
| 2.2 应用薄层层析色谱法对β-兴奋剂残留进行检测 |
| 3 结束语 |
（6）β-兴奋剂在动物性食品中残留的免疫分析方法研究进展（论文提纲范文）
| 1 放射免疫分析 |
| 2荧光免疫分析 |
| 1.1 荧光偏振免疫分析 (fluorescence polarizationimmunoassay, FPIA) |
| 1.2 时间分辨荧光免疫分析 (time-resolved fluoro-immunoassay, TRFIA) |
| 1.3 荧光猝灭免疫分析 (fluorescence quenching immunoassay, FQIA) 和荧光增强免疫分析 (fluores-cence enhanced immunoassay, FEIA) |
| 1.4 量子点荧光免疫分析 |
| 3 酶免疫分析 |
| 3.1 抗原包被直接竞争ELISA (direct competitiveELISA with antigens coated on the solid phase) |
| 3.2 间接竞争ELISA (indirect competitive ELISA) |
| 4 化学发光免疫分析 |
| 4.1 化学发光免疫分析 (chemiluminescence immu-noassay, CLIA) |
| 4.2 化学发光酶免疫分析 (chemiluminescence en-zyme immunoassay, CLEIA) |
| 4.3 电化学发光免疫分析 (electrochemilumines-cence immunoassay, ECLIA) |
| 5 胶体金标记免疫分析 |
| 6 免疫芯片 |
| 7 免疫传感器 |
| 8 流动注射免疫分析 |
| 9 免疫PCR |
| 1 0 其他免疫方法 |
| 1 1 多组分残留 |
| 1 2 结语 |
（7）畜产品中β-兴奋剂ELISA快速检测方法的建立与检测（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 术语和英文缩写词表 |
| 1 前言 |
| 1.1 β-兴奋剂的理化性质 |
| 1.2 β-兴奋剂的生理作用 |
| 1.2.1 促进动物的生长作用 |
| 1.2.2 影响蛋白质和脂肪的代谢 |
| 1.2.3 影响心血管和子宫平滑肌的作用 |
| 1.2.4 致突变性 |
| 1.3 β-兴奋剂的应用现状和危害 |
| 1.4 β-兴奋剂检测方法研究现状 |
| 1.4.1 β-兴奋剂类药物及其代谢物残留检测方法 |
| 1.4.2 酶联免疫吸附检测方法(ELISA) |
| 1.5 本研究的目的和意义 |
| 1.6 建立 β-兴奋剂检测的间接ELISA检测方法 |
| 1.7 技术路线 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验设备 |
| 2.1.1 主要仪器设备 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要溶液的配制 |
| 2.2 β-兴奋剂间接竞争酶联免疫分析方法(ic ELISA)的建立 |
| 2.2.1 间接ELISA方法步骤的建立 |
| 3 间接ELISA分析方法条件的建立 |
| 3.1 条件优化 |
| 3.1.1 方阵滴定试验 |
| 3.1.2 最佳抗体稀释液类型的确定 |
| 3.1.3 抗体反应时间的确定 |
| 3.1.4 最佳pH值的确定 |
| 3.1.5 β-兴奋剂间接ELIS A标准曲线的建立 |
| 3.2 交叉反应 |
| 3.3 方法精密度测定 |
| 3.4 稳定性测定 |
| 3.5 间接ELISA法测定实际样品猪尿中 β-兴奋剂的含量 |
| 3.5.1 猪尿中CLB(SAL)的提取 |
| 3.5.2 猪尿中回收率测定 |
| 3.5.3 回收率的计算 |
| 3.5.4 比对实验 |
| 4 结果与分析 |
| 4.1 β-兴奋剂间接ELISA分析方法条件的建立 |
| 4.1.1 条件优化 |
| 5 试剂盒性能参数评价 |
| 5.1 间接ELISA方法的特异性分析 |
| 5.2 精密度的测定 |
| 5.2.1 板间变异 |
| 5.2.2 批内变异 |
| 5.2.3 日间变异 |
| 5.2.4 稳定性 |
| 5.3 实际样品分析 |
| 5.3.1 猪尿样品的回收率测定 |
| 5.3.2 比对实验结果 |
| 6 讨论与结论 |
| 6.1 讨论 |
| 6.1.1 ELISA方法影响因素分析 |
| 6.1.2 棋盘法的选择 |
| 6.1.3 洗涤作用的影响 |
| 6.1.4 基质的影响 |
| 6.1.5 pH的影响 |
| 6.2 结论 |
| 6.3 创新点 |
| 6.4 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
（8）苯乙醇胺A免疫-LAMP检测技术的研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 β-兴奋剂 |
| 1.1.1 化学结构 |
| 1.1.2 理化性质 |
| 1.1.3 作用机制 |
| 1.1.4 药物作用 |
| 1.1.5 残留危害 |
| 1.1.6 β-兴奋剂检测的研究现状 |
| 1.2 苯乙醇胺A概述 |
| 1.2.1 苯乙醇胺A简介 |
| 1.2.2 苯乙醇胺A残留检测方法 |
| 1.3 免疫-PCR检测方法及研究进展 |
| 1.3.1 免疫PCR技术 |
| 1.3.2 免疫PCR的原理 |
| 1.3.3 实时荧光定量免疫PCR技术 |
| 1.3.4 免疫PCR研究进展 |
| 1.3.5 环介导等温扩增技术（LAMP） |
| 1.4 研究目的及意义 |
| 2 PEAA人工抗原与抗体制备 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 试剂 |
| 2.1.2 实验动物 |
| 2.1.3 仪器设备 |
| 2.1.4 缓冲液配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 PEAA的制备与鉴定 |
| 2.2.2 PEAA衍生物的制备与鉴定 |
| 2.2.3 免疫原和包被原的制备 |
| 2.2.4 人工抗原合成鉴定 |
| 2.3 PEAA兔多克隆抗体的制备与鉴定 |
| 2.3.1 兔多克隆抗体制备 |
| 2.3.2 兔多克隆抗体效价测定 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 PEAA的制备与鉴定 |
| 2.4.2 PEAA衍生物的制备与鉴定 |
| 2.4.3 人工抗原的鉴定 |
| 2.4.4 PEAA兔克隆抗体的制备与鉴定 |
| 2.5 小结 |
| 3 PEAA间接竞争ELISA方法的建立 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 主要试剂 |
| 3.1.2 主要仪器设备 |
| 3.1.3 缓冲液配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 PEAA多克隆抗体与人工抗原最佳工作浓度确定 |
| 3.2.2 PEAA间接竞争ELISA法的标准曲线和灵敏度 |
| 3.2.3 特异性 |
| 3.2.4 添加回收试验 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 PEAA多克隆抗体与人工抗原最佳工作浓度确定 |
| 3.3.2 PEAA间接竞争ELISA法的标准曲线和灵敏度 |
| 3.3.3 特异性 |
| 3.3.4 添加回收试验 |
| 3.4 小结 |
| 4 PEAA间接竞争免疫PCR（IPCR）方法的建立 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 主要试剂 |
| 4.1.2 溶液配制 |
| 4.1.3 主要仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 报告DNA的筛选 |
| 4.2.2 生物素标记的报告DNA（Bio-DNA）的制备及鉴定 |
| 4.2.3 制备及鉴定生物素标记的PEAA多克隆抗体（Bio-PEAA p Ab） |
| 4.2.4 免疫PCR反应条件的优化 |
| 4.2.5 PEAA免疫PCR方法的建立 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 报告DNA的设计与筛选 |
| 4.3.2 Bio-DNA制备与鉴定 |
| 4.3.3 Bio-PEAA p Ab的鉴定 |
| 4.3.4 免疫PCR条件优化 |
| 4.3.5 PEAA免疫PCR检测方法研究 |
| 4.4 小结 |
| 5 基于间接竞争IPCR方法PEAA间接竞争免疫-LAMP方法的建立 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.1.1 主要试剂和仪器设备 |
| 5.1.2 缓冲液配制 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 LAMP引物的设计 |
| 5.2.2 高效扩增的LAMP反应体系优化 |
| 5.2.3 包被抗原PEAA-OVA与Bio-PEAA pAb1#ILAMP下的最佳工作浓度优 |
| 5.2.4 PEAA免疫-LAMP方法的建立 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 LAMP引物的设计 |
| 5.3.2 高效扩增的LAMP反应体系优化 |
| 5.3.3 PEAA-OVA与Bio-PEAA pAb1#ILAMP下的最佳工作浓度选择 |
| 5.3.4 PEAA免疫LAMP检测方法步骤 |
| 5.3.5 线性范围与检测灵敏度 |
| 5.3.6 最低检测限 |
| 5.3.7 特异性 |
| 5.3.8 准确性 |
| 5.3.9 精密度 |
| 5.4 小结 |
| 6 结论与展望 |
| 6.1 全文总结 |
| 6.2 创新点 |
| 参考文献 |
| 作者简历 |
（9）β-兴奋剂性质及其最新检测方法研究进展（论文提纲范文）
| 1 β-兴奋剂的介绍 |
| 2 检测方法研究进展 |
| 2.1 免疫分析技术 |
| 2.1.1 化学发光免疫分析法(CLIA) |
| 2.1.2 荧光免疫分析法(FIA) |
| 2.1.3 放射免疫层析法(RIA) |
| 2.2 色谱法 |
| 2.2.1 高效毛细管电泳技术(HPCE) |
| 2.2.2 薄层层析色谱法(TLC) |
| 2.3 生物传感器法 |
| 2.4 分子印迹技术(MIT) |
| 2.5 红外光谱分析法 |
| 3 小结 |
（10）胶体金免疫层析试纸条在猪尿β-兴奋剂多残留检测中的应用（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料与仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 胶体金溶液的制备 |
| 1.2.2 金标抗体的制备 |
| 1.2.3 胶体金免疫层析试纸条制备及参数的优化 |
| 1.2.4 胶体金免疫层析试纸条标曲的建立 |
| 1.2.5 交叉反应率 |
| 1.2.6 胶体金免疫层析试纸条方法评价 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 胶体金质量鉴定 |
| 2.2 胶体金免疫层析试纸条参数的优化 |
| 2.3 胶体金免疫层析试纸条标曲的建立 |
| 2.4 交叉反应 |
| 2.5 胶体金免疫层析试纸条方法评价 |
| 2.6 与ELISA试剂盒比较 |
| 2.7 与HPLC/MS方法的比较 |
| 3 结论 |
四、β-兴奋剂的检测方法概述（论文参考文献）
- [1]新兴技术在沙丁胺醇残留检测中的应用进展[J]. 李红杰. 化学工程师, 2021(02)
- [2]超高效液相色谱-串联质谱法测定牛乳中21种β-兴奋剂[J]. 张立佳,胡雪,莫楠,白艳梅,张悦,刘丽君,李翠枝. 乳业科学与技术, 2020(03)
- [3]高效液相色谱-质谱联用同时检测动物源食品中9种β-兴奋剂残留[J]. 任宏彬,杨晓伟,贾晓婷,杨蒲晨,张志华,郭素平. 农产品质量与安全, 2020(01)
- [4]超高压液相色谱—四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱快速筛查养殖水产品及渔用投入品中多种类药物的研究[D]. 汪洋. 上海海洋大学, 2018(05)
- [5]动物组织中β-兴奋剂类药物残留检测方法研究进展[J]. 申惠敏. 中国畜牧兽医文摘, 2017(07)
- [6]β-兴奋剂在动物性食品中残留的免疫分析方法研究进展[J]. 刘硕,陶晓奇. 食品与发酵工业, 2017(08)
- [7]畜产品中β-兴奋剂ELISA快速检测方法的建立与检测[D]. 林晓慧. 华南农业大学, 2017(08)
- [8]苯乙醇胺A免疫-LAMP检测技术的研究[D]. 林俊潇. 中国计量大学, 2017(03)
- [9]β-兴奋剂性质及其最新检测方法研究进展[J]. 聂婉,伍晓红,陈秋玲,王琤韡. 黑龙江畜牧兽医, 2016(23)
- [10]胶体金免疫层析试纸条在猪尿β-兴奋剂多残留检测中的应用[J]. 李莎,白瑞樱,曾道平,伍志权,沈玉栋,徐振林,杨金易. 食品工业科技, 2016(20)