中国第一头本土克隆牛“大尼”即将诞生

一、中国第一头土生土长的克隆牛“大妮”即将诞生（论文文献综述）

朱化彬^[1]（2011）在《奶牛体外胚胎生产技术的研究》文中研究指明体外受精和体细胞克隆技术是提供牛胚胎移植胚胎来源的重要技术方法。本试验（论文）研究了影响牛体外性控胚胎影响因素（试验一）和体细胞克隆的影响因素（试验二）,研究了不同冷冻方法对牛体外受精和体细胞克隆胚胎ATP含量和ROS水平的影响（试验三）,利用实时定量PCR研究了马-牛异种体细胞克隆胚胎线粒体DNA情况（试验四）,得到以下试验结果:试验一:本实验研究了卵母细胞体外成熟后卵丘细胞脱除程度、种公牛个体以及性控精液受精滴体积、性控精子密度等对牛体外性控胚胎生产的影响。试验结果表明:1、卵丘细胞部分脱除组的卵裂率（67±4.74%）显着性高于不脱除组（41±2.23%）、完全脱除组（37.50±2.88%）（P<0.05）;2、种公牛B的性控精液进行体外受精,囊胚率（26.53±3.31%）要显着高于A公牛（17.65±3.65%）和C公牛（16.67±2.36%）（P<0.05）;3、50μL～100μL受精滴囊胚率（20.41±4.33%～23.38±4.47%）无显着性差异（P>0.05）,但显着性高于40μL、30μL的囊胚率（13.79±2.02%、12.12±3.73%）（P<0.05）;4、精子密度0.5×106个/ mL～1×106个/mL的囊胚率（22.58±2.17%～27.27±3.49%）相比无显着性差异（P>0.05）,但显着性高于0.3×106个/mL-1组的囊胚率（16.13±3.46%）（P<0.05）。试验二:本试验研究了奶牛克隆重构胚不同化学激活方法、克隆重构胚体外培养条件和公牛和母牛供体细胞等对奶牛手工克隆和显微注射克隆效率的影响。试验结果表明:（1）建立了优秀种公牛体细胞系20个,高产奶牛体细胞系4个;（2）A23187+6-DMAP和A23187+放线菌酮组合处理激活体细胞克隆重构胚卵裂率（82.62% VS 78.15%）和囊胚率（34.15% VS 30.21%）差异不显着,但是A23187+6-DMAP囊胚质量较好;（3）克隆重构胚在mCR1aa培养液卵裂率（83.65%）和囊胚率（34.36%）,均显着高于SOF和CR1aa两种培养液;（4）血清饥饿处理供体细胞的克隆重构胚融合率（90.52%±2.62）、卵裂率81.27%±3.68和囊胚率（31.46%±2.42）和接触抑制的克隆重构胚（89.25%±1.92）、（82.44%±4.42）、（30.44%±2.77）差异不显着;（5）种牛克隆胚胎移植妊娠率37.0%（10/27）,其中青年荷斯坦母牛移植妊娠率（46.2%）显着高于经产西门塔尔杂交受体母牛（28.6%）。西门答尔杂交受体母牛移植克隆胚胎后分别在妊娠的70～90d内流产,1头荷斯坦母牛妊娠受体101天后屠宰,1头荷斯坦母牛妊娠155天流产2个胎儿,1头荷斯坦妊娠149天流产2个胎儿。试验三:本实验采用常规法或玻璃化法（OPS法）冷冻保存牛IVF囊胚和SCNT囊胚,利用ATP Bioluminescence Assay Kit HS II和GENMED ROS Assay Kit检测冷冻-解冻后囊胚ATP含量和ROS水平。试验结果表明:1、IVF和SCNT囊胚OPS法冷冻-解冻后存活率（92.24±4.54%,78.71±5.91%）均显着高于常规冷冻法（81.56±2.33%、47.89±5.83%）（P<0.05）;2、IVF囊胚和SCNT囊胚OPS法冷冻-解冻后ATP含量（0.62±0.04 pmol, 0.30±0.01 pmol）均显着高于常规冷冻法（0.43±0.06 pmol, 0.21±0.02 pmol）（P<0.05）;但是均显着低于相应的IVF或SCNT对照组新鲜囊胚（0.74±0.05 pmol,0.39±0.01 pmol）;3、玻璃化冷冻IVF囊胚（72.14±4.31 cps）、SCNT囊胚（40.11±5.73 cps）ROS水平高于新鲜IVF囊胚（47.33±3.56 cps）、SCNT囊胚（26.44±1.49 cps）（P<0.05）,常规冷冻组则与此相反（34.41±3.32 cps vs.47.33±3.56 cps;15.46±2.45 cps vs.26.44±1.49 cps）（P<0.05）。试验四:本试验研究了手工克隆和显微注射方法对马-牛异种克隆效率的影响,利用实时荧光定量RT-PCR方法检测马-牛异种克隆胚胎不同发育阶段线粒体编码基因细胞色素B的转录水平。试验结果表明:（1）手工方法克隆马-牛异种重构胚融合率（95.12%）、卵裂率（97.07%）显着高于显微注射法的融合率（70.25%）和卵裂率（85.21%）,但两者之间的囊胚率差异不显着（2.64%±1.68 vs2.36%±1.59）;（2）供体马CYBT基因的表达水平在1-细胞期的重构胚中表达量最高,而在囊胚期,却没有检测到该基因的转录本。牛CYBT基因,在1-细胞期到8-细胞期,其表达量逐渐下降,而在16-细胞期的异种克隆胚中,该基因的表达量急剧升高到最高值,比1-细胞期增加了11倍,随后囊胚期表达水平锐减到为起始水平的2倍。

谭丽莎,金炜,程凯^[2]（2003）在《透视民企“新疆现象”（上篇）》文中提出编者按：新疆作为西部大开发的重中之重，几年来，经济发展特别是民营经济发展日趋活跃，民营经济已成为新疆国民经济发展中的一支生力军。 据有关部门统计，到2002年底，全疆个体工商户已达到43．2万户，比1997年增加9．5万户，注册资金70．6亿元；私营企业已发展到2．8?

雁翎^[3]（2002）在《中国克隆牛诞生记》文中进行了进一步梳理 2002年3月7日,备受人们瞩目的我国克隆牛科研项目,经严格的鉴定、检测后,中科院、国家自然科学基金会和山东省政府正式宣布:我国首批自主完成的成年体细胞克隆牛成功问世。这群"出身不凡"的牛犊,是我国在生命科学和生物技术领域科研攻关的又一重大突破。它标志着我国的动物克隆研究已跻身于世界先进水平行列,成为继日本、新西兰、美国等国家之后掌握了体细胞克隆牛关键技术的少数国家之一。五里墩开"产"我国首批克隆牛2001年3月,中科院动物研究所陈大元教授主持的"家畜的无性繁殖（克隆）"项目在山东省曹县五里墩村悄然拉开序幕。合作单位归一集团山东中大动物胚胎工程中心对130头母牛实

二、中国第一头土生土长的克隆牛“大妮”即将诞生（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、中国第一头土生土长的克隆牛“大妮”即将诞生（论文提纲范文）

（1）奶牛体外胚胎生产技术的研究（论文提纲范文）

四、中国第一头土生土长的克隆牛“大妮”即将诞生（论文参考文献）

• [1]奶牛体外胚胎生产技术的研究[D]. 朱化彬. 甘肃农业大学, 2011(04)
• [2]透视民企“新疆现象”（上篇）[N]. 谭丽莎,金炜,程凯. 中华工商时报, 2003
• [3]中国克隆牛诞生记[J]. 雁翎. 华夏星火, 2002(04)

标签：冷冻胚胎论文;  克隆空间论文;  囊胚论文;  胚胎论文;